LC梯度色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素
LC梯度色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素有进样器、检测器和连接管中的死体积4188云顶集团采用细内径的管路,尽量减小连接管路的长度,采用死体积小的检测器,采用合适的进样方式和技术,可降低柱外效应4188云顶集团
一、采用细内径的管路,尽量减小连接管路的长度4188云顶集团
若管路内径减小,其长度可增加4188云顶集团若管路内径增大,其长度要缩短4188云顶集团内径0.25mm连接管应为100mm左右或更短4188云顶集团内径0.5mm连接管,长度应在10mm以下4188云顶集团
连接管内径减小,管内压力降较大,泵压会上升4188云顶集团
二、采用死体积小的检测器4188云顶集团
一般检测池内色谱峰展宽小于总的色谱峰展宽的10%时,要求检测池体积小于14μL,一般为5~8μL4188云顶集团
三、LC梯度色谱仪采用合适的进样方式和技术4188云顶集团
进样有时是色谱峰展宽的主要原因,这取决于进样体积和进样方式4188云顶集团
进样体积越大,柱外效应越大4188云顶集团
进样方式一般有阀进样与注射器进样两种4188云顶集团阀进样允许进样体积大,注射进样允许进样体积小4188云顶集团进样体积还与溶质k值有关,溶质k值越大,允许进样的体积越大4188云顶集团
LC梯度色谱仪不分流进样时,在气化室中气化的含有大量溶剂的样品不可能瞬间进入毛细管柱,溶剂峰会严重拖尾,使早流出组分的色谱峰被掩盖在溶剂拖尾峰中,从而使分析变得困难甚至不可能4188云顶集团这种由于进样时间延长引起的色谱峰展宽称为时间性谱带展宽4188云顶集团时间性谱带展宽可采用溶剂效应和热浓缩来抑制4188云顶集团
所谓溶剂效应是指进祥时柱温比溶剂沸点低15~30℃,当不分流进样完毕后,打开分流阀,用载气吹扫气化室中残留的溶质和溶剂,同时柱温开始升高,溶剂开始蒸发,溶质以窄的起始谱带开始进行分离的过程4188云顶集团
LC梯度色谱仪所谓热浓缩是指进样时柱温比溶质沸点低很多,使溶质冷凝在柱头上,同时柱温比溶剂沸点高很多,使溶剂保留为气态的过程4188云顶集团在此条件下不会出现溶剂效应4188云顶集团如果柱温比溶质沸点低150℃以上,热浓缩会有效地把溶质浓缩到很窄的区带上4188云顶集团